中华人民共和国国家标准
GB4789.35—2016
食品安全国家标准
食品微生物学检验 乳酸菌检验
2016-12-23发布 2017-06-23实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
国家食品药品监督管理总局发布GB4789.35—2016
Ⅰ 前 言
本标准代替GB4789.35—2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验》、
SN/T1941.1—2007《进出口食品中乳酸菌检验方法 第1部分:分离与计数方法》。
本标准与GB4789.35—2010相比,主要变化如下:
———增加了乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明;
———修改了改良MRS培养基成分;
———修改了平板计数的接种方法和接种量。GB4789.35—2016
1 食品安全国家标准
食品微生物学检验 乳酸菌检验
1 范围
本标准规定了含乳酸菌食品中乳酸菌(lacticacidbacteria)的检验方法。
本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验。
2 术语和定义
2.1
乳酸菌 lacticacidbacteria
一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称。本标准中乳酸菌主要为乳杆菌属(Lactobacillus)、双
歧杆菌属(Bifidobacterium)和嗜热链球菌属(Streptococcus)。
3 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
3.1 恒温培养箱:36℃±1℃。
3.2 冰箱:2℃~5℃。
3.3 均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳钵。
3.4 天平:感量0.01g。
3.5 无菌试管:18mm×180mm、15mm×100mm。
3.6 无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。
3.7 无菌锥形瓶:500mL、250mL。
4 培养基和试剂
4.1 生理盐水:见A.1。
4.2 MRS(ManRogosaSharpe)培养基及莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin)和半胱氨酸盐酸盐(Cysteine
Hydrochloride)改良MRS培养基:见A.2和A.3。
4.3 MC培养基(ModifiedChalmers培养基):见A.4。
4.4 0.5%蔗糖发酵管:见A.5。
4.4 0.5%纤维二糖发酵管:见A.5。
4.6 0.5%麦芽糖发酵管:见A.5。
4.7 0.5%甘露醇发酵管:见A.5。
4.8 0.5%水杨苷发酵管:见A.5。
4.9 0.5%山梨醇发酵管:见A.5。
4.10 0.5%乳糖发酵管:见A.5。GB4789.35—2016
2 4.11 七叶苷发酵管:见A.6。
4.12 革兰氏染色液:见A.7。
4.13 莫匹罗星锂盐(Li-Mupirocin):化学纯。
4.14 半胱氨酸盐酸盐(CysteineHydrochloride):纯度>99%。
5 检验程序
乳酸菌检验程序见图1。
图1 乳酸菌检验程序图
6 操作步骤
6.1 样品制备
6.1.1 样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。
6.1.2 冷冻样品可先使其在2℃~5℃条件下解冻,时间不超过18h,也可在温度不超过45℃的条件
解冻,时间不超过15min。
6.1.3 固体和半固体食品:以无菌操作称取25g样品,置于装有225mL生理盐水的无菌均质杯内,于
8000r/min~10000r/min均质1min~2min,制成1∶10样品匀液;或置于225mL生理盐水的无菌
均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min制成1∶10的样品匀液。
6.1.4 液体样品:液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25mL放入装有225mL生理盐
水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分振摇,制成1∶10的样品匀液。
GB 4789.35-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验
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