书 书 书/G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ５００９ ． ２２ — ２０１６ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G21 /G22 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E 犅 /G2F /G30 犌 /G2F /G31 /G32 /G33 ２０１６  １２  ２３ /G34 /G35 ２０１７  ０６  ２３ /G36 /G37 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G26 /G2D /G2E /G2C /G2F /G30 /G31 /G32 /G27 /G28 /G33 /G34 /G35 /G34 /G36 /G37 /G38 /G39 /G3A /G3B /G34 /G35书 书 书犌犅 ５００９ ． ２２ — ２０１６ Ⅰ 　　　　前 　　 言 　　 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ５００９．２２ — ２００３ 《 食品中黄曲霉毒素 Ｂ １ 的测定 》、 ＧＢ ／ Ｔ５００９．２３ — ２００６ 《 食品中黄曲霉毒素 Ｂ １ 、 Ｂ ２ 、 Ｇ １ 、 Ｇ ２ 的测定 》、 ＧＢ５００９．２４ — ２０１０ 《 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素 Ｍ １ 和 Ｂ １ 的测定 》、 ＧＢ ／ Ｔ２３２１２ — ２００８ 《 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 Ｂ １ 、 Ｂ ２ 、 Ｇ １ 、 Ｇ ２ 、 Ｍ １ 、 Ｍ ２ 的测定 　 液相色谱  荧光检测法 》、 ＧＢ ／ Ｔ１８９７９ — ２００３ 《 食品中黄曲霉毒素的测定 　 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法 》、 ＳＮ０３３９ — １９９５ 《 出口茶叶中黄曲霉毒素 Ｂ １ 检验方法 》、 ＳＮ ／ Ｔ１６６４ — ２００５ 《 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素 Ｍ １ 、 Ｂ １ 、 Ｂ ２ 、 Ｇ １ 、 Ｇ ２ 含量的测定 》、 ＳＮ ／ Ｔ１１０１ — ２００２ 《 进出口油籽及粮谷中黄曲霉毒素的检验方法 》、 ＳＮ０６３７ — １９９７ 《 出口油籽 、 坚果及坚果制品中黄曲霉毒素的检验方法 　 液相色谱法 》、 ＳＮ ／ Ｔ１７３６ — ２００６ 《 进出口蜂蜜中黄曲霉毒素的检验方法 　 高效液相色谱法 》、 ＮＹ ／ Ｔ１２８６ — ２００７ 《 花生黄曲霉毒素 Ｂ １ 的测定 　 高效液相色谱法 》。 本标准与 ＧＢ ／ Ｔ５００９．２２ — ２００３ 相比 ， 主要变化如下 ： ——— 标准名称修改为 “ 食品安全国家标准 　 食品中黄曲霉毒素 Ｂ 族和 Ｇ 族的测定 ”； ——— 根据 ＧＢ２７６１ — ２０１１ 的要求 ， 增加了方法的适用范围 ； ——— 增加了同位素稀释液相色谱  串联质谱法为第一法 ； ——— 增加了高效液相色谱  柱前衍生法为第二法 ； ——— 增加了高效液相色谱  柱后衍生法为第三法 ； ——— 修改了酶联免疫法 ， 并将方法名称更改为酶联免疫吸附筛查法 ； ——— 增加了免疫亲和柱以及酶联免疫试剂盒质量判定要求与方法 ； ——— 修改了测定组分为黄曲霉毒素 Ｂ 族和 Ｇ 族化合物 。犌犅 ５００９ ． ２２ — ２０１６ １ 　　　　食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素 犅 族和 犌 族的测定 １ 　 范围 本标准规定了食品中黄曲霉毒素 Ｂ １ 、 黄曲霉毒素 Ｂ ２ 、 黄曲霉毒素 Ｇ １ 、 黄曲霉毒素 Ｇ ２ （ 以下简称 ＡＦＴＢ １ 、 ＡＦＴＢ ２ 、 ＡＦＴＧ １ 和 ＡＦＴＧ ２ ） 的测定方法 。 本标准第一法为同位素稀释液相色谱  串联质谱法 ， 适用于谷物及其制品 、 豆类及其制品 、 坚果及籽类 、 油脂及其制品 、 调味品 、 婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 ＡＦＴＢ １ 、 ＡＦＴＢ ２ 、 ＡＦＴＧ １ 和 ＡＦＴＧ ２ 的测定 。 本标准第二法为高效液相色谱  柱前衍生法 ， 适用于谷物及其制品 、 豆类及其制品 、 坚果及籽类 、 油脂及其制品 、 调味品 、 婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 ＡＦＴＢ １ 、 ＡＦＴＢ ２ 、 ＡＦＴＧ １ 和 ＡＦＴＧ ２ 的测定 。 本标准第三法为高效液相色谱  柱后衍生法 ， 适用于谷物及其制品 、 豆类及其制品 、 坚果及籽类 、 油脂及其制品 、 调味品 、 婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 ＡＦＴＢ １ 、 ＡＦＴＢ ２ 、 ＡＦＴＧ １ 和 ＡＦＴＧ ２ 的测定 。 本标准第四法为酶联免疫吸附筛查法 ， 适用于谷物及其制品 、 豆类及其制品 、 坚果及籽类 、 油脂及其制品 、 调味品 、 婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 ＡＦＴＢ １ 的测定 。 本标准第五法为薄层色谱法 ， 适用于谷物及其制品 、 豆类及其制品 、 坚果及籽类 、 油脂及其制品 、 调味品中 ＡＦＴＢ １ 的测定 。 第一法 　 同位素稀释液相色谱  串联质谱法 ２ 　 原理 试样中的黄曲霉毒素 Ｂ １ 、 黄曲霉毒素 Ｂ ２ 、 黄曲霉毒素 Ｇ １ 、 黄曲霉毒素 Ｇ ２ ， 用乙腈  水溶液或甲醇  水 溶液提取 ， 提取液用含 １％ＴｒｉｔｏｎＸ１００ （ 或吐温 ２０ ） 的磷酸盐缓冲溶液稀释后 （ 必要时经黄曲霉毒素固相净化柱初步净化 ）， 通过免疫亲和柱净化和富集 ， 净化液浓缩 、 定容和过滤后经液相色谱分离 ， 串联质谱检测 ， 同位素内标法定量 。 ３ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 本方法所用试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的一级水 。 ３ ． １ 　 试剂 ３ ． １ ． １ 　 乙腈 （ ＣＨ ３ ＣＮ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ２ 　 甲醇 （ ＣＨ ３ ＯＨ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ３ 　 乙酸铵 （ ＣＨ ３ ＣＯＯＮＨ ４ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ４ 　 氯化钠 （ ＮａＣｌ ）。犌犅 ５００９ ． ２２ — ２０１６ ２ 　　　　 ３ ． １ ． ５ 　 磷酸氢二钠 （ Ｎａ ２ ＨＰＯ ４ ）。 ３ ． １ ． ６ 　 磷酸二氢钾 （ ＫＨ ２ ＰＯ ４ ）。 ３ ． １ ． ７ 　 氯化钾 （ ＫＣｌ ）。 ３ ． １ ． ８ 　 盐酸 （ ＨＣｌ ）。 ３ ． １ ． ９ 　 ＴｒｉｔｏｎＸ１００ ［ Ｃ １４ Ｈ ２２ Ｏ （ Ｃ ２ Ｈ ４ Ｏ ） 狀 ］（ 或吐温 ２０ ， Ｃ ５８ Ｈ １１４ Ｏ ２６ ）。 ３ ． ２ 　 试剂配制 ３ ． ２ ． １ 　 乙酸铵溶液 （ ５ｍｍｏｌ ／ Ｌ ）： 称取 ０．３９ｇ 乙酸铵 ， 用水溶解后稀释至 １０００ｍＬ ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ２ 　 乙腈  水溶液 （ ８４＋１６ ）： 取 ８４０ｍＬ 乙腈加入 １６０ｍＬ 水 ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ３ 　 甲醇  水溶液 （ ７０＋３０ ）： 取 ７００ｍＬ 甲醇加入 ３００ｍＬ 水 ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ４ 　 乙腈  水溶液 （ ５０＋５０ ）： 取 ５０ｍＬ 乙腈加入 ５０ｍＬ 水 ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ５ 　 乙腈  甲醇溶液 （ ５０＋５０ ）： 取 ５０ｍＬ 乙腈加入 ５０ｍＬ 甲醇 ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ６ 　 １０％ 盐酸溶液 ： 取 １ｍＬ 盐酸 ， 用纯水稀释至 １０ｍＬ ， 混匀 。 ３ ． ２ ． ７ 　 磷酸盐缓冲溶液 （ 以下简称 ＰＢＳ ）： 称取 ８．００ｇ 氯化钠 、 １．２０ｇ 磷酸氢二钠 （ 或 ２．９２ｇ 十二水磷酸氢二钠 ）、 ０．２０ｇ 磷酸二氢钾 、 ０．２０ｇ 氯化钾 ， 用 ９００ｍＬ 水溶解 ， 用盐酸调节 ｐＨ 至 ７．４±０．１ ， 加水稀释至 １０００ｍＬ 。 ３ ． ２ ． ８ 　 １％ＴｒｉｔｏｎＸ１００ （ 或吐温 ２０ ） 的 ＰＢＳ ： 取 １０ｍＬＴｒｉｔｏｎＸ１００ （ 或吐温 ２０ ）， 用 ＰＢＳ 稀释至 １０００ｍＬ 。 ３ ． ３ 　 标准品 ３ ． ３ ． １ 　 ＡＦＴＢ １ 标准品 （ Ｃ １７ Ｈ １２ Ｏ ６ ， ＣＡＳ ： １１６２６５８ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 。 ３ ． ３ ． ２ 　 ＡＦＴＢ ２ 标准品 （ Ｃ １７ Ｈ １４ Ｏ ６ ， ＣＡＳ ： ７２２０８１７ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 。 ３ ． ３ ． ３ 　 ＡＦＴＧ １ 标准品 （ Ｃ １７ Ｈ １２ Ｏ ７ ， ＣＡＳ ： １１６５３９５ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 。 ３ ． ３ ． ４ 　 ＡＦＴＧ ２ 标准品 （ Ｃ １７ Ｈ １４ Ｏ ７ ， ＣＡＳ ： ７２４１９８７ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质 。 ３ ． ３ ． ５ 　 同位素内标 １３ Ｃ １７ ＡＦＴＢ １ （ Ｃ １７ Ｈ １２ Ｏ ６ ， ＣＡＳ ： １２１７４４９４５０ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 浓度为 ０．５ μ ｇ ／ ｍＬ 。 ３ ． ３ ． ６ 　 同位素内标 １３ Ｃ １７ ＡＦＴＢ ２ （ Ｃ １７ Ｈ １４ Ｏ ６ ， ＣＡＳ ： １２１７４７０９８８ ）： 纯度 ≥ ９８％ ， 浓度为 ０．５ μ ｇ ／ ｍＬ 。 ３ ． ３ ． ７ 　 同位素内标 １