ICS65.050 B72 中华人民共和国国家标准 GB/T33029—2016 松节油及相关萜烯产品组成 毛细管气相色谱分析方法 Compositionofturpentineandrelatedterpeneproducts— Testmethodsofcapillarygaschromatography 2016-10-13发布 2017-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅰ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 原理 1 ……………………………………………………………………………………………………… 3 分析方法 1 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(资料性附录) 松节油及相关萜烯产品组成毛细管气相色谱图 4 ………………………………GB/T33029—2016 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家林业局提出并归口。 本标准起草单位:中国林业科学研究院林产化学工业研究所、广西梧州日成林化股份有限公司。 本标准主要起草人:赵振东、李冬梅、毕良武、李前、王婧、陈玉湘、卢言菊、古研。 ⅠGB/T33029—2016 松节油及相关萜烯产品组成 毛细管气相色谱分析方法 1 范围 本标准规定了松节油和相关萜烯产品中α-蒎烯、β-蒎烯、双戊烯、萜烯醇等各主要成分含量的毛细 管气相色谱分析方法。 本标准适用于松节油、双戊烯、松油、松脂中性萜烯以及其他相关萜烯产品的分析与检验。 2 原理 松节油和相关萜烯产品中的组分气化后经过气相色谱柱能够得到很好的分离,各相关组分的质量 分数可通过其与内标物质建立相对校正因子的方法进行定量测定。松节油和相关萜烯产品中的各组分 因其都能得到充分气化并进行气相色谱分离,其组分的相对质量分数还可利用组分的峰面积百分数(归 一化法)进行计算。 3 分析方法 3.1 试剂和材料 3.1.1 α-蒎烯(标样):纯度应大于99%。 3.1.2 β-蒎烯(标样):纯度应大于99%。 3.1.3 可作为标样使用的其他萜烯化合物。 3.1.4 正癸烷(内标物):色谱纯试剂,纯度应大于99%。 3.1.5 正己烷:分析纯试剂。 3.1.6 10g/L酚酞指示剂:取1g酚酞用95%乙醇溶解并稀释至100mL。 3.1.7 100g/L氢氧化钾乙醇溶液:将氢氧化钾100g溶于150mL蒸馏水中,再加95%乙醇至1000mL。 3.1.8 载气:氮气、氦气按所用检测器的类型使用,一般纯度应大于99.99%。 3.1.9 空气:需要经过滤、净化和干燥。 3.2 仪器和设备 3.2.1 气相色谱仪:具有氢火焰离子化检测器(FID)和程序升温控制系统的气相色谱仪。 3.2.2 气相色谱柱:可选用内涂非极性或弱极性固定液的石英毛细管色谱柱。推荐使用柱长30m、内 径0.25mm和固定液膜厚0.25μm的色谱柱。 3.2.3 天平:分析天平精度为0.1mg。 3.2.4 微量进样器:进样器容量为0.5μL、1.0μL、10μL。 3.2.5 具塞试管:2mL。 3.3 内标法 3.3.1 校正标准溶液的配制 在具塞试管中,加入相近质量的萜烯化合物标准样品(如:α-蒎烯50mg、β-蒎烯50mg,准确至 1GB/T33029—2016 0.1mg)和一定量的内标物质(如:正癸烷15mg,准确至0.1mg),再加入1mL正己烷,塞好后充分摇 匀混合后得到的溶液即为校正标准溶液。 3.3.2 气相色谱分析条件 色谱分析条件依据色谱仪可能会有所不同,应根据色谱仪的型号和性能,制定能达到最佳分离效果 的色谱条件。但推荐的色谱分析条件如下: a) 升温程序:60℃(保持2min;3℃/min)→120℃(8℃/min)→240℃(保持10min); b) 检测器:FID; c) 检测器温度:280℃; d) 进样口温度:280℃; e) 分流比:65∶1。 3.3.3 相对校正因子的测定 按上述色谱分析条件分析校正标准溶液,进样量0.1μL~1.0μL,记录每个组分的保留时间和峰面 积,按式(1)计算单个萜烯化合物的相对校正因子(Fi)。 Fi=AEmR ARmE…………………………(1) 式中: AE———正癸烷的峰面积,单位为微伏秒(μV·s); mR———单个萜烯化合物(标样)的纯品质量,单位为克(g); AR———单个萜烯化合物(标样)的峰面积,单位为微伏秒(μV·s); mE———内标物正癸烷的纯品质量,单位为克(g)。 3.3.4 试样的制备 称取50mg萜烯样品和15mg正癸烷,均准确至0.1mg,放入具塞试管中,加1mL正己烷,充分 混合后作为试样。 注:当待测样品为松脂时,需要进行预处理,且松脂中性萜烯的组成宜使用峰面积归一化法为主进行分析。 3.3.5 测定 柱温稳定后,按上述色谱分析条件分别对已经制备的试样进行分析,进样量0.1μL~1.0μL。 3.3.6 计算 根据松节油及相关萜烯产品的气相色谱分析图(参考附录A),确定每个峰的峰面积。根据峰面积, 按式(2)计算各组分的质量分数,以校正的峰面积百分数wi(%)表示。 wi=FimISAi mSAIS×100 …………………………(2) 式中: Fi———单个萜烯化合物的相对校正因子; mIS———加入内标物正癸烷的质量,单位为克(g); Ai———组分i的峰面积,单位为微伏秒(μV·s); mS———试样的质量,单位为克(g); AIS———内标物正癸烷的峰面积,单位为微伏秒(μV·s)。 2GB/T33029—2016 3.4 峰面积归一化法 3.4.1 保留时间标准溶液的配制 按校正标准溶液的配制方法进行操作,但是不需称量,配成保留时间标准溶液。 3.4.2 试样的制备 按3.3.4的操作方法进行试样的制备,但是不加入内标物癸烷,根据仪器不同有时也可不加入溶剂 正己烷。 3.4.3 松脂中性萜烯试样的制备 称取50mg~100mg松脂,用1mL正己烷溶解,配成50mg/mL~100mg/mL的溶液,加入2滴 酚酞指示剂,滴加100g/L氢氧化钾乙醇溶液至溶液呈淡红色30s不消退,静置10min分层,取上层透 明正己烷溶液作为试样。 注:当待测样品为松脂时,测定松脂中性萜烯的组成宜使用峰面积归一化法为主进行分析。 3.4.4 测定 柱温稳定后,按上述色谱分析条件对已经制备的保留时间标准溶液和分析试液进行分析,松脂中单 萜和倍半萜试样分析参照附录A的色谱条件进行分析,进样量0.1μL~1.0μL。 3.4.5 计算 计算除溶剂外各组分的峰面积,按式(3)计算各组分的相对质量分数,以峰面积百分数ci(%) 表示: ci=Ai ∑ i=0~nAi×100 …………………………(3) 式中: Ai ———组分i的峰面积,单位为微伏秒(μV·s); ∑ i=0~nAi———除溶剂以外的所有色谱峰的面积的总和,单位为微伏秒(μV·s)。 3.5 结果和重复性 以同一样品的几次(至少3次)测定结果的平均值作为相对校正因子F和单个萜烯化合物的质量 分数的结果。计算所得数值偏离平均值应不超出±2.5%的范围。 3.6 报告 单个萜烯化合物的质量分数,报告到0.1%。 3GB/T33029—2016 附 录 A (资料性附录) 松节油及相关萜烯产品组成毛细管气相色谱图 本附录中,松节油及相关萜烯产品组成毛细管气相色谱图包括:内标法的松节油气相色谱图、内标 法的双戊烯气相色谱图、归一化法的松油气相色谱图和归一化法的松脂中性萜烯气相色谱图。见 图A.1~图A.4。 说明: 1———α-蒎烯; IS———内标物(正癸烷); 8———长叶烯; 2———莰烯; 5———苧烯; 9———石竹烯。 3———β-蒎烯; 6———γ-松油烯; 4———月桂烯; 7———异松油烯; 图A.1 松节油气相色谱图(内标法) 4GB/T33029—2016 说明: 2———莰烯; 5———苧烯; 7———异松油烯。 IS———内标物(正癸烷);6———γ-松油烯; 图A.2 双戊烯色谱图(内标法) 说明: 1———α-蒎烯; 6———γ-松油烯; 11———γ-松油醇。 2———莰烯; 7———异松油烯; 5———苧烯; 10———α-松油醇; 图A.3 松油气相色谱图(归一化法) 5GB/T33029—2016