ICS11.220 CCSB41 中华人民共和国国家标准 GB/T46337—2025 动物新型冠状病毒感染诊断技术 Diagnosticsforanimalinfectionwith severeacuterespiratorysyndromecoronavirus2 2025-10-05发布 2026-05-01实施 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会发布目 次 前言 Ⅲ ………………………………………………………………………………………………………… 引言 Ⅳ ………………………………………………………………………………………………………… 1 范围 1 ……………………………………………………………………………………………………… 2 规范性引用文件 1 ………………………………………………………………………………………… 3 术语和定义 1 ……………………………………………………………………………………………… 4 缩略语 1 …………………………………………………………………………………………………… 5 生物安全要求 1 …………………………………………………………………………………………… 6 临床诊断 2 ………………………………………………………………………………………………… 7 样品采集、处理和保存 2 …………………………………………………………………………………… 8 荧光RT-PCR 4 …………………………………………………………………………………………… 9 病毒分离鉴定 5 …………………………………………………………………………………………… 10 综合判定 6 ………………………………………………………………………………………………… 附录A(规范性) 溶液配制(所用试剂为分析纯) 7 ……………………………………………………… 附录B(规范性) 荧光RT-PCR引物和探针序列信息及反应体系配制表 8 …………………………… 附录C(资料性) 荧光RT-PCR检测及结果判定参考图 9 ……………………………………………… 附录D(规范性) 荧光RT-PCR检测结果判定 10 ………………………………………………………… 附录E(资料性) Vero细胞感染SARS-CoV-2的CPE参考图 11 ……………………………………… ⅠGB/T46337—2025 前 言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中华人民共和国农业农村部提出。 本文件由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。 本文件起草单位:中国动物卫生与流行病学中心、中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。 本文件主要起草人:王楷宬、谭文杰、潘俊慧、黄保英、魏世萌、祁倩、王素春、李阳、隋金钰、周凯钰太、 李超、刘华雷、康京丽。 ⅢGB/T46337—2025 引 言 新型冠状病毒(SevereAcuteRespiratorySyndromeCoronavirus2,SARS-CoV-2)属于β冠状病毒 属,是一种有包(囊)膜的单股正链RNA病毒,基因组大小约为30kb,病毒颗粒呈球形或椭球形,直径 为60nm~140nm。 截至2024年,至少36个国家报告了动物SARS-CoV-2感染病例,涉及犬、猫、貂、虎、狮、白尾鹿、大 猩猩、雪豹以及河马等。除上述自然感染动物外,研究发现兔和狐狸等动物也会人工感染SARS-CoV-2。 SARS-CoV-2感染动物后可能发生变异,导致病毒感染宿主谱扩大,加大了SARS-CoV-2防控难度。 基于当前动物SARS-CoV-2感染情况及其危害制定的本文件,能用于各类动物SARS-CoV-2感染 的诊断。 ⅣGB/T46337—2025 动物新型冠状病毒感染诊断技术 1 范围 本文件规定了动物新型冠状病毒感染的临床诊断、样品采集、处理和保存、荧光RT-PCR和病毒分 离鉴定等方法的技术要求。 本文件适用于动物新型冠状病毒感染的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB19489 实验室 生物安全通用要求 NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CPE:细胞病变(CytopathicEffect) Ct值:循环阈值(CycleThreshold) DMEM:培养基(Dulbecco’SModifiedEagleMedium) EDTA:乙二胺四乙酸(EthyleneDiamineTetraaceticAcid) FBS:胎牛血清(FetalBovineSerum) N:核衣壳蛋白(NucleocapsidProtein) ORF1ab:开放阅读框1ab(OpenReadingFrame1ab) PBS:磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSolution) RNA:核糖核酸(RibonucleicAcid) RT-PCR:反转录聚合酶链式反应(ReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction) SARS-CoV-2:新型冠状病毒(SevereAcuteRespiratorySyndromeCoronavirus2) Vero:非洲绿猴肾细胞(AfricanGreenMonkeyKidney) VeroE6:非洲绿猴肾细胞E6(AfricanGreenMonkeyKidneyE6) 5 生物安全要求 进行动物新型冠状病毒感染的检测和诊断时,样品采集与处理、核酸提取和病毒分离鉴定等,按照 1GB/T46337—2025 GB19489的规定执行。 6 临床诊断 6.1 流行病学 6.1.1 传染源:主要为SARS-CoV-2感染的患者和动物,及受污染的物品和环境。 6.1.2 传播途径:主要经呼吸道飞沫和密切接触传播,在相对封闭环境中可经气溶胶传播。 6.1.3 易感动物:主要为貂等鼬科动物;猫、狮子、虎和豹等猫科动物;大猩猩等非人类灵长类动物;鼠 等啮齿类动物;白尾鹿和犬等其他动物。老龄动物较易感。 6.2 临床症状 6.2.1 呼吸道症状:咳嗽、喷嚏、流涕、呼吸窘迫。 6.2.2 消化道症状:呕吐、腹泻。 6.2.3 全身症状:发烧、食欲不振、嗜睡。 6.3 病理变化 6.3.1 影像学检查:可见肺叶有毛玻璃混浊和/或斑片状病变。 6.3.2 眼观病变:可见鼻和气管黏膜上皮局部充血、水肿以及分泌物等。 6.3.3 组织病理学检查:肺泡腔内充满粉红色渗出液、淋巴细胞和脱落的上皮细胞;肺泡间隔增宽,有 大量渗出液;部分感染动物小肠上皮细胞变性、坏死。 6.4 临床判定 符合6.1,且出现6.2或6.3中的一条或多条情况时,可初步判定为临床疑似感染。确诊应采集样品 进行实验室诊断。 7 样品采集、处理和保存 7.1 仪器设备 7.1.1 台式高速冷冻离心机。 7.1.2 组织匀浆器或研磨器。 7.1.3 高压灭菌器。 7.1.4 漩涡振荡器。 7.1.5 生物安全柜:Ⅱ级或Ⅱ级以上。 7.1.6 微量可调移液器(100μL和1000μL)。 7.2 试剂材料 7.2.1 除另有规定外,所用试剂均为分析纯,所用水为GB/T6682规定的二级水。 7.2.2 0.01mol/LPBS(pH7.2),配制方法按照附录A中A.1。 7.2.3 样品稀释液,配制方法按照A.2。 7.2.4 采样管:2mL,无菌无核酸酶。 7.2.5 样品保存管:15mL和50mL,无菌无核酸酶螺口离心管。 7.2.6 一次性无菌采样拭子。 2GB/T46337—2025